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保障細胞培養實驗順的關鍵要點:如何進行前期準備

更新時間:2023-09-25  |  點擊率:464

工欲善其事,必先利其器。想要做好細胞實驗,前期的準備很重要。

 

1、選擇正確的培養基

 

在養細胞之前,就要了解,你所養細胞的來源以及種類和名稱。

 

選擇正規途徑來源的細胞,索取細胞培養條件,并查閱文獻,確定所需培養液種類以及是否需要添加特殊成分,常用的細胞培養液有DMEMRPMI1640F12等等,一些常見的細胞基本可以使用這幾種培養基中的一種來培養,有的需要加入一定其他成分,這需要根據不同的細胞類型,查ATCC細胞庫或者查文獻,才能找到所需最佳培養液。選擇正確的培養液是養好細胞的第一步。

 

2、了解細胞的生長習性

 

不同的細胞生長習性不同。如成纖維細胞是貼壁生長,有一定的密度依賴性,密度小可能會出現不增殖,狀態差的情況,接種密度大時則需要隔天傳代,頻繁傳代則影響細胞狀態;再如RPMI-8226人多發性骨髓瘤細胞,是懸浮生長的,傳代需離心棄去上清即可。總之,了解細胞生長習性,再加上正確的計數,才能掌握好傳代的密度。

 

3、準備無菌環境

 

千里之堤潰于蟻穴,細菌、真菌、支原體等微生物的生長速度塊和破壞力強,會破壞細胞結構,影響實驗結果。使用紫外線照射、定期用專用試劑進行實驗室清潔等,都有助于降低細胞污染的風險。

 

4、選擇優質的血清

 

血清中含有細胞生長所必須的生長因子,作為哺乳動物細胞培養的附加物,血清的添加是十分重要的,因此,選擇優質的血清,是細胞培養成功與否的關鍵!Ausbian進口胎牛血清,內毒素含量低,澳洲血源,全程冷鏈運輸,為細胞培養保駕護航。